檢測試劑盒是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體(聚苯乙烯微量反應板)表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的ELISA法有雙抗體夾心法和間接法,前者用于檢測大分子抗原,后者用于測定特異抗體。
檢測試劑盒實驗原理:
1、抗原或抗體能吸附于固相載體表面,并堅持其免疫學活性;
2、抗原或抗體可通過共價鍵與酶銜接構成酶結合物,而此種酶結合物仍能堅持其免疫學和酶學活性;
3、酶結合物與相應抗原或抗體結合后,可依據參加底物的色彩反響來斷定是否有免疫反響的存在,并且色彩反響的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的,ELISA檢測試劑盒可依據已知濃度的抗原或抗體的色彩反響的深淺制作規范曲線并依此計算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。
檢測試劑盒樣本處理及要求:
1、組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20 分鐘左右。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
2、標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
3、不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。