DT40雞淋巴瘤細胞（STR鑒定）

DT40雞淋巴瘤細胞（STR鑒定）
英文名稱：Chicken lymphoma Cells
規格：1*10 ⁶  
細胞介紹
DT40是來自Hyline SC雞法氏囊淋巴細胞株經鳥類白血病病毒誘導建株的。原始淋巴瘤用羅氏相關病毒1(RAV-1)感染出生１天的小雞得到。法氏囊中生成的腫瘤制成細胞懸液后通過靜脈注射輸入同基因型的受體小雞。經過一次體內移植后，建立了DT40細胞株。 這株細胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游，表達的c-myc RNA水平較高。它缺少一個正常c-myc基因，但含有兩個拷貝ALV去調控的myc基因。這株細胞保留了重排免疫球蛋白輕鏈基因(IgL)的能力。 在IgL位點，DT40包含一個重排和一個胚系同源基因。c-rel基因和v-rel癌基因在DT40細胞株中都能誘導組織相容性(MHC)II類抗原表達。v-rel 誘導的MHCII表達比c-rel誘導快，且其有效性在數周后達到c-rel的50倍。這株細胞呈淋巴母細胞表型。傳染性檢測表明DT40釋放低水平的傳染性RAV-1。這株細胞可以用于穩轉研究。
一、細胞特性
1） 來源：法氏囊，淋巴瘤
2） 形態：淋巴母細胞，懸浮
3） 含量：>1x106 個/mL
4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
二、細胞收到后處理
DT40雞淋巴瘤細胞（STR鑒定）在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿完全培養液并封好瓶口是細胞運輸的辦法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養液移入廢液缸中，原瓶（T25瓶）保留6-8ml完全培養液，懸浮細胞需離心處理，放入37℃、5%CO2孵箱培養；超過80%匯合度時，根據情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養步驟。
三、細胞培養步驟
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中，加入約6ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
2、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集，1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，進行離心收集，1000RPM條件下離心5分鐘，去除上清，按凍存數量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
出現問題，可重發的情況有哪些？判定標準是什么？
（1）細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、破損、漏液等，重發；

1. 凍存的細胞復蘇后，絕大多數細胞未存活，重發；
2. 存活的細胞靜置24小時后，絕大多數細胞未存活，重發；
3. 凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封，出現污染，重發；
4. 視具體情況而定。

 ★ 注：如運輸過程中導致細胞污染或者死亡，我們將無條件補發 收貨后十個工作日內有其他問題提供照片可半價重發。

相關細胞系列表：

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